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dna提取浓度偏低原因(dna提取)

2023-08-19 17:32:08 来源: 用户: 

你们好,最近小时发现有诸多的小伙伴们对于dna提取浓度偏低原因,dna提取这个问题都颇为感兴趣的,今天小活为大家梳理了下,一起往下看看吧。

1、 酚提取法:先用卵酶K和SDS破碎细胞消化蛋白,再用酚和酚氯提取,高速离心后取上清液,得到的DNA大小为100-150kb。

2、 甲酰胺解聚法:细胞如上破碎,然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质和DNA的结合体,然后透析得到DNA,DNA可以是200 KB左右。

3、 玻璃棒缠绕法:用盐酸胍裂解细胞,将裂解液铺在乙醇上,然后用钩子或U形玻璃棒在界面处轻轻搅拌,将DNA沉淀溶液缠绕在玻璃棒上。生成的DNA约为80kb。

4、 异丙醇沉淀法:基本与方法1相同,只是用2倍体积的异丙醇代替乙醇,可以去除小分子RNA(溶于异丙醇)。

5、 表面活性剂的快速制备方法:用TritonX-100A或NP40表面活性剂破碎细胞,然后用蛋白酶K或苯酚去除蛋白质,再用乙醇沉淀或透析。

6、 加热法快速制备:96-100加热五分钟,然后离心取上清液,可用于PCR反应。

7、 碱变性快速制备:用NaOH 20分钟,然后加入HCI中和,离心后取上清液,含少量DNA。

以上就是dna提取这篇文章的一些介绍,希望对大家有所帮助。

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